RNA標(biāo)記是將標(biāo)記物（如放射性同位素、熒光素或酶）共價(jià)地連接到RNA，通過檢測標(biāo)記物，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標(biāo)記在分子探針領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，在疾病診斷方面也很有前景。

 

理想的RNA標(biāo)記方法應(yīng)符合以下要求：

1.  操作簡單，靈敏度高

2.  不影響堿基配對的特異性

3.  不影響RNA活性

4.  對酶促反應(yīng)活性無影響或影響不大

5.  檢測方法具有高度靈敏性和高度特異性

6.  標(biāo)記物對人體無害

 

按反應(yīng)機(jī)制分如下四類：直接標(biāo)記法，加尾標(biāo)記法，基于逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的標(biāo)記方法，基于RNA克隆擴(kuò)增的標(biāo)記方法。

 

常用于RNA標(biāo)記的方法按標(biāo)記物性質(zhì)分為：

放射性同位素標(biāo)記：32P、35S、3H

非放射性標(biāo)記：半抗原熒光素化學(xué)發(fā)光物質(zhì)

 

用生物素標(biāo)記RNA的方法常見的是用生物素與UTP結(jié)合形成Biotin-UTP，以Biotin-UTPATP、CTP、GTP為底物通過RNA聚合酶SP6、T7等經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄合成標(biāo)記RNA。

 

目前常見的熒光染料包括：異硫氰酸熒光素（FITC）四甲基異硫氰酸羅丹明四乙基羅丹明得克薩斯紅藻紅蛋白（PE）花青類染料(Cy3、Cy5)新型熒光素如量子點(diǎn)（半導(dǎo)體納米晶體）。

 

點(diǎn)擊化學(xué)（Clickchemistry）是2001年諾貝爾化學(xué)獎獲得者美國化學(xué)家Sharpless提出的一種快速合成大量化合物的新方法。該技術(shù)在諸多領(lǐng)域尤其是生物偶聯(lián)技術(shù)和生物醫(yī)藥方面有廣泛應(yīng)用前景。

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